三區劃線。

以泥土為例，取適量泥土，浸泡於無菌水中，震盪3-5分鐘，沉澱，取上清液體，平板塗布，培養24h，挑取自己目的菌的單菌落，在培養基上三區劃線培養24h，得到目的微生物的純菌落。

分離培養是對微生物進行研究的一種方法，目的在於從自然物上混雜的微生物群體中獲得所需要的純種微生物。分離培養常在固體平板培養基上用劃線分離法或液體稀釋法或單孢子分離法等進行

首先你需要確定你分離的是什麼微生物，然後按照以下步驟 選擇合適的富集培養基，加入土壤把目標菌屬富集 選擇合適的選擇性培養基把目標菌屬分離出來。 透過稀釋平板塗布，培養三天後，觀察不同的菌落，在平板反面用記號筆編號不同的菌落。 把標記的菌落在培養基上劃線分離，每一個編號劃線三個平板 待平板長出單菌落後，顯微鏡鏡檢，觀察目標菌是否單一。 單一菌落即為微生物的純培養體。

最常用的兩種方法：

1．平板劃線分離法把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細胞用接種環在平板培養基，透過分區劃線稀釋而得到較多獨立分佈的單個細胞，經培養後生長繁殖成單菌落，通常把這種單菌落當作待分離微生物的純種優點：可以觀察菌落特徵，對混合菌進行分離。缺點：不能計數，一般用於從菌種的分離純化。例如：篩選大腸桿菌菌種。

2．稀釋塗布平板法將菌液進行一系列的梯度稀釋，然後將不同稀釋度的菌液分別塗布到瓊脂固體培養基的表面，進行培養。在稀釋度足夠高的菌液裡，聚集在一起的微生物將被分散成單個細胞，從而能在培養基表面形成單個的菌落。優點：可以計數，可以觀察菌落特徵。缺點：吸收量較少，較麻煩，平板不幹燥效果不好，容易蔓延。一般用於平板培養基的回收率計數。 例如：測定純淨水中大腸桿菌的含量。