應該可以
草履蟲是原生動物的重要代表,也是初學動物學最先接觸的動物。以草履蟲為代表的纖毛蟲在水質淨化及監測上有著十分重要的價值。本實驗主要是介紹草履蟲的純化和多種培養方法,並通過觀察,掌握原生動物的基本特徵,進而更好地理解有關原生動物的其他知識。
一、實驗準備
(一)材料:幹稻草、舊稻草墊子、幹玉米雄花穗、幹荷葉、小麥粒、離芭葉、乾酵母、動物內臟(肝、胰、甲狀腺等)、蛋黃、牛肉汁(50g牛肉、 100 g水,煮熟)。
(二)用品:顯微鏡、放大鏡、電爐、恆溫培養箱、載玻片、蓋玻片、滴管、微吸管、解剖針、燒杯、培養皿、凹玻璃片、紗布、吸水紙、大頭針、瓊膠、質量分數為3%的甲基纖維素溶液、碘液、葡萄糖、氯化鈉、質量分數為1%的洋紅溶液、質量分數為0.1%的中性紅溶液。
(三)採集和培養:
1.採集:
選取多處進行採集。凡是有機物含量豐富的汙水,均可採250~500 mL水樣,當場用放大鏡檢查。水樣鏡檢,凡呈乳白色,個體較大,圓柱狀,一端稍圓一端稍尖的動物,就是草履蟲。如果多次檢查均未發現草履蟲,水樣可棄之,另選別處採集。水樣取回,經顯微鏡檢查,凡含有草履蟲的水樣,要在離水樣瓶10~20cm處,放置一盞燈,經以24 h照明,使草履蟲向水的上層聚集。
2.培養液製備:
製備方法較多,可根據教學實際進行選用。
(1)稻草培養液 幹稻草10g,剪成3Cm長,放人燒杯,加水1000 m1,煮沸10~15 min,放涼,補足失去水分。在1000 mL水麵處劃一刻度線,便於日後失水再補。
(2)玉米雄花穗培養液 幹玉米雄花穗15 g,剪成3Cm長,加水1000 m1,煮沸10~15 min。
(3)荷葉培養液 幹荷葉50 g,適當撕碎,加水1000 mL,煮沸15~20 min。
(4)麥粒培養液 小麥粒100顆,加水1000 mL,煮沸10~15 min。
(5)離芭、稻草混合培養液 離芭葉25 g,加水500 m1,煮沸5 min,補足失去的水分後,再加稻草培養液500 m1。
(6)乾酵母培養液 市售乾酵母0.59,加水1000 mL,搖蕩均勻後備用。
(7)臟器培養液 動物內臟5g,剪碎,加水1000 m1,浸泡1 d,濾去內臟與殘渣,留下純淨培養液。
(8)蛋黃培養液 煮熟雞蛋黃2g,加水1000 m1,攪拌均勻。
(9)稻草墊培養液 舊稻草墊,取其10 g,剪成3cm長,加水1000 mL,再加50g葡萄糖。
以上方法中,第1~8種,無論培養液煮沸與否均要放進恆溫箱,在25~300C下培養1~2 d,目的是促使培養液長出細菌,以便接種草履蟲後,供草履蟲索餌。而第9種方法,既不需煮沸培養液,又不需接種草履蟲,直接將培養液放進恆溫箱培養,只要稻草上附有草履蟲包囊,當包囊處於適宜條件時,草履蟲就會破囊而出,進行旺盛的代謝活動,在5~7 d內大量繁殖起來。
3.培養
下面介紹三種培養方法。
(1)採集的水樣經一晝夜照光,從水麵下1Cm處,在瓶壁上已經形成一圈“白線”的地方,用微吸管取液。滴一滴到載片上,經鏡檢證實水滴中只含草履蟲,無任何其他微型生物時,就可用一個新的乾淨滴管吸培養液,將載片上的草履蟲吹人培養瓶中,放置在25~300C環境中繼續培養5~7 d,草履蟲就會大量繁殖起來。
(2)如果水樣中混有少量其他微型生物,可以在載片上先滴一滴牛肉汁,再滴一滴含有草履蟲的水樣,兩滴間距2cm左右,用解剖針從肉汁一端引一條線到含有草履蟲的水滴上。兩滴連結後,用放大鏡仔細觀察,會發現草履蟲對牛肉汁敏感性很強,草履蟲游到牛肉汁滴的速度也快。然後迅速將載玻片放置在顯微鏡下檢查,在確認牛肉汁滴內尤其他微型生物時,迅速用吸水紙切斷連結線,用紗布擦乾另一側的水滴,用於淨滴管把含草履蟲的牛肉汁吹人培養瓶中。如此重複操作幾次,然後將培養瓶放在25~300C溫度下繼續培養,5~7bd後就會有大量草履蟲繁殖出來。
(3)如果水樣中混雜微型生物的種類與數量過多,不易排除,就需要採用逐步擴大法。一般是從水樣中取液,在凹玻片內滴上1~2滴,放置在顯微鏡下,邊觀察邊用微吸管吸走其他微型生物。當凹坑水中無任何其他微型生物而只含草履蟲時,往凹坑放少許培養液,在25~300C下培養,每日補加1/3~2/3培養液。如果幾天後,草履蟲數量有所增加,就將其轉入表面皿或培養皿,繼續擴大培養。如果再過幾天后草履蟲純化培養效果理想,數量又有所增加,就要再轉入大容器培養液繼續培養,一直到大容器培養液出現雲霧狀群落,鏡檢全是草履蟲時為止。
這裡特別需要指出的是,草履蟲的培養有可能失敗。究其原因很多,其中有兩點是主要的:其一,可能是接種草履蟲的數量過少,個體質量又較差,它們進入新環境後,遇有不適,很快死去,未能傳宗接代;其二,可能是稻草之類的材料發霉或殘留農藥過多,接種後的草履蟲中毒死亡,不能繁殖。因此,一旦發現培養液混濁、有特異臭味,鏡檢無草履蟲,就要棄之。為避免由於培養失敗貽誤教學工作,應多做幾瓶培養液,多選用幾種培養方法。
應該可以
草履蟲是原生動物的重要代表,也是初學動物學最先接觸的動物。以草履蟲為代表的纖毛蟲在水質淨化及監測上有著十分重要的價值。本實驗主要是介紹草履蟲的純化和多種培養方法,並通過觀察,掌握原生動物的基本特徵,進而更好地理解有關原生動物的其他知識。
一、實驗準備
(一)材料:幹稻草、舊稻草墊子、幹玉米雄花穗、幹荷葉、小麥粒、離芭葉、乾酵母、動物內臟(肝、胰、甲狀腺等)、蛋黃、牛肉汁(50g牛肉、 100 g水,煮熟)。
(二)用品:顯微鏡、放大鏡、電爐、恆溫培養箱、載玻片、蓋玻片、滴管、微吸管、解剖針、燒杯、培養皿、凹玻璃片、紗布、吸水紙、大頭針、瓊膠、質量分數為3%的甲基纖維素溶液、碘液、葡萄糖、氯化鈉、質量分數為1%的洋紅溶液、質量分數為0.1%的中性紅溶液。
(三)採集和培養:
1.採集:
選取多處進行採集。凡是有機物含量豐富的汙水,均可採250~500 mL水樣,當場用放大鏡檢查。水樣鏡檢,凡呈乳白色,個體較大,圓柱狀,一端稍圓一端稍尖的動物,就是草履蟲。如果多次檢查均未發現草履蟲,水樣可棄之,另選別處採集。水樣取回,經顯微鏡檢查,凡含有草履蟲的水樣,要在離水樣瓶10~20cm處,放置一盞燈,經以24 h照明,使草履蟲向水的上層聚集。
2.培養液製備:
製備方法較多,可根據教學實際進行選用。
(1)稻草培養液 幹稻草10g,剪成3Cm長,放人燒杯,加水1000 m1,煮沸10~15 min,放涼,補足失去水分。在1000 mL水麵處劃一刻度線,便於日後失水再補。
(2)玉米雄花穗培養液 幹玉米雄花穗15 g,剪成3Cm長,加水1000 m1,煮沸10~15 min。
(3)荷葉培養液 幹荷葉50 g,適當撕碎,加水1000 mL,煮沸15~20 min。
(4)麥粒培養液 小麥粒100顆,加水1000 mL,煮沸10~15 min。
(5)離芭、稻草混合培養液 離芭葉25 g,加水500 m1,煮沸5 min,補足失去的水分後,再加稻草培養液500 m1。
(6)乾酵母培養液 市售乾酵母0.59,加水1000 mL,搖蕩均勻後備用。
(7)臟器培養液 動物內臟5g,剪碎,加水1000 m1,浸泡1 d,濾去內臟與殘渣,留下純淨培養液。
(8)蛋黃培養液 煮熟雞蛋黃2g,加水1000 m1,攪拌均勻。
(9)稻草墊培養液 舊稻草墊,取其10 g,剪成3cm長,加水1000 mL,再加50g葡萄糖。
以上方法中,第1~8種,無論培養液煮沸與否均要放進恆溫箱,在25~300C下培養1~2 d,目的是促使培養液長出細菌,以便接種草履蟲後,供草履蟲索餌。而第9種方法,既不需煮沸培養液,又不需接種草履蟲,直接將培養液放進恆溫箱培養,只要稻草上附有草履蟲包囊,當包囊處於適宜條件時,草履蟲就會破囊而出,進行旺盛的代謝活動,在5~7 d內大量繁殖起來。
3.培養
下面介紹三種培養方法。
(1)採集的水樣經一晝夜照光,從水麵下1Cm處,在瓶壁上已經形成一圈“白線”的地方,用微吸管取液。滴一滴到載片上,經鏡檢證實水滴中只含草履蟲,無任何其他微型生物時,就可用一個新的乾淨滴管吸培養液,將載片上的草履蟲吹人培養瓶中,放置在25~300C環境中繼續培養5~7 d,草履蟲就會大量繁殖起來。
(2)如果水樣中混有少量其他微型生物,可以在載片上先滴一滴牛肉汁,再滴一滴含有草履蟲的水樣,兩滴間距2cm左右,用解剖針從肉汁一端引一條線到含有草履蟲的水滴上。兩滴連結後,用放大鏡仔細觀察,會發現草履蟲對牛肉汁敏感性很強,草履蟲游到牛肉汁滴的速度也快。然後迅速將載玻片放置在顯微鏡下檢查,在確認牛肉汁滴內尤其他微型生物時,迅速用吸水紙切斷連結線,用紗布擦乾另一側的水滴,用於淨滴管把含草履蟲的牛肉汁吹人培養瓶中。如此重複操作幾次,然後將培養瓶放在25~300C溫度下繼續培養,5~7bd後就會有大量草履蟲繁殖出來。
(3)如果水樣中混雜微型生物的種類與數量過多,不易排除,就需要採用逐步擴大法。一般是從水樣中取液,在凹玻片內滴上1~2滴,放置在顯微鏡下,邊觀察邊用微吸管吸走其他微型生物。當凹坑水中無任何其他微型生物而只含草履蟲時,往凹坑放少許培養液,在25~300C下培養,每日補加1/3~2/3培養液。如果幾天後,草履蟲數量有所增加,就將其轉入表面皿或培養皿,繼續擴大培養。如果再過幾天后草履蟲純化培養效果理想,數量又有所增加,就要再轉入大容器培養液繼續培養,一直到大容器培養液出現雲霧狀群落,鏡檢全是草履蟲時為止。
這裡特別需要指出的是,草履蟲的培養有可能失敗。究其原因很多,其中有兩點是主要的:其一,可能是接種草履蟲的數量過少,個體質量又較差,它們進入新環境後,遇有不適,很快死去,未能傳宗接代;其二,可能是稻草之類的材料發霉或殘留農藥過多,接種後的草履蟲中毒死亡,不能繁殖。因此,一旦發現培養液混濁、有特異臭味,鏡檢無草履蟲,就要棄之。為避免由於培養失敗貽誤教學工作,應多做幾瓶培養液,多選用幾種培養方法。