PCR是在試管中進行的 DNA複製反應,基本原理是依據細胞內 DNA半保留複製的機理,以

及體外 DNA 分子與不同溫度下雙鏈和單鏈可以互相轉變的性質,人為地控制體外合成系統的溫度,以 促使雙鏈DNA變成單鏈,單鏈 DNA與人工合成的引物退火,然後耐熱 DNA聚合酶以dNTP為原料使引

物沿著單鏈模板延伸為雙鏈 DNAo PCR全過程每一步的轉換是通過溫度的改變來控制的。需要重複進行

DNA 模板解鏈、引物與模板 DNA 結合、 DNA 聚合酶催化新生 DNA 的合成,即高溫變性、低溫退火、中 溫延伸3個步驟構成 PCR反應的一個循環,此循環的反復進行,就可使目的 DNA得以迅速擴增。

類似於DNA的天然複製過程，其特異性依賴於與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物。PCR由變性→退火→延伸三個基本反應步驟構成：

①模板DNA的變性：7a686964616fe78988e69d8331333366303738模板DNA經加熱至93℃左右一定時間後，使模板DNA雙鏈或經PCR擴增形成的雙鏈DNA解離，使之成為單鏈，以便它與引物結合，為下輪反應作准備。

②模板DNA與引物的退火（復性）：模板DNA經加熱變性成單鏈後，溫度降至55℃左右，引物與模板DNA單鏈的互補序列配對結合。

③引物的延伸：DNA模板--引物結合物在72℃、DNA聚合酶（如TaqDNA聚合酶）的作用下，以dNTP為反應原料，靶序列為模板，按鹼基互補配對與半保留複製原理，合成一條新的與模板DNA鏈互補的半保留複製鏈。

重複循環變性→退火→延伸三過程就可獲得更多的“半保留複製鏈”，而且這種新鏈又可成為下次循環的模板。每完成一個循環需2～4分鐘，2～3小時就能將待擴目的基因擴增放大幾百萬倍。