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2 # 完美生話美好每一天
培養基的配製:
1、配料:在容器中加入少量水,按照配方稱取各種藥品,加足所需水量(一藥一勺,取藥後立即蓋上瓶蓋)。
2、溶解:澱粉溶解:少量冷水調成糊狀,加熱溶解,特別是加有瓊脂的培養基,一定要煮沸,瓊脂的熔解溫度95-97℃ ,且需要邊加熱邊攪拌以防止燒焦。
3、調PH:用1N的鹽酸或1N的 NaOH把培養基調節到所要求的值。
4、過濾:濾紙或棉花進行過濾。
5、分裝:一般培養基放在三角瓶或試管中滅菌使用。
(1)三角瓶
若作靜置培養,則100ml培養基/250ml的三角瓶,最多不能超過150ml培養基/250ml的三角瓶,否則滅菌時培養基沸騰容易汙染棉塞,造成染菌;若作搖瓶培養,則15-20ml培養基/250ml的三角瓶,保證通氣良好。
(2)試管分裝
液體培養基一般裝4-5ml,約試管的1/4高度。
固體斜面培養基一般裝3-4ml,約試管的1/5高度。
6、包紮:分裝好後,塞上棉塞,在用牛皮紙將棉塞包裹好,防止滅菌時水份進入把棉塞弄溼。
7、滅菌:按配方上要求的溫度、壓力進行高壓蒸汽滅菌。如果滅菌的溫度太高,營養成分會被破壞,培養基中的糖、氨基酸會使培養基的顏色變深。
8、擺斜面:滅菌後需要擺斜面的試管要趁熱斜著擺放,使其凝固成為一個斜面,約佔試管長度的1/2。
9、貯存:培養基在30℃下放置一天,無汙染的即可使用。一般用牛皮紙包裹好存放於2-8℃冰箱中備用。
成分:蛋白腖 10g
牛肉膏 3g
氯化鈉 5g
瓊脂 15~20g
蒸餾水 1000mL
製法:將除瓊脂以外的各成分溶解於蒸餾水內,加入15%氫氧化鈉溶液約2mL,校正pH至7.2~7.4。加入瓊脂,加熱煮沸,使瓊脂溶化。分裝燒瓶,121℃高壓滅菌15min。
注意:此培養基可供一般細菌培養之用,可傾注平板或製成斜面。如用於菌落計數,瓊脂量為1.5%;如作成平板或斜面,則應為2%。