-
1 # 簡單星空hG
-
2 # 粵東小城
在體外培養條件下,動物細胞會自發融合,但是頻率極低。因此,一般都需要添加具有誘導細胞融合效應的生物或化學藥劑,或者採用電融合技術,人為地促進細胞融合。
細胞融合法 20世紀80年代建立起來的細胞融合技術,是將兩種細胞的混合液置於低壓交流電場中,使細胞聚集成串珠狀,然後施加高壓電脈衝,以促使細胞融合。
緊密排列的細胞,在相互接觸的細胞膜之間會出現無蛋白顆粒的脂質區,當受到電擊時,這個區域就會被擊穿,產生脂雙層膜孔,導致細胞之間的細胞質連通,進而發生細胞融合
細胞融合技術有許多優點,如誘導細胞融合的頻率高,對細胞無毒害作用,操作簡便,可重複性好。
-
3 # 雨過天晴281682556
誘導植物細胞的原生質體和動物細胞融合。人工誘導的方法有物理法和化學法。物理法包括離心、振動、電激等;化學法一般用聚乙二醇作為誘導劑來誘導細胞融合
-
4 # 簡單星空hG
細胞融合的具體步驟包括:
(1)細胞準備,分貼壁和懸浮細胞兩種。前者可直接將兩親本細胞混合培養,後者需製成一定濃度的細胞懸浮液。
(2)細胞融合,加促融因子於將行融合的細胞之中,誘導融合。
(3)雜種細胞選擇。利用選擇性培養基等,使親本細胞死亡,而讓雜種細胞存活。
動物細胞融合
(4)雜種細胞克隆。對選出的雜種細胞進行克隆(選擇與純化),經過培養,就能獲得所需要的無性繁殖系。
植物細胞融合較動物細胞難些。首先,植物細胞外面有細胞壁,因此需要先用纖維素酶和果膠酶去壁,形成原生質體後,才能進行細胞融合。其次,植物細胞融合後形成的雜種細胞,經過培養有可能先脫分化發育成愈傷組織然後再分化為植物體,而動物細胞的雜種細胞則缺乏此種能力。植物體細胞融合的過程大致包括:細胞分離,原生質體製備,原生質體融合,雜種細胞篩選及其培養,然後再通過愈傷組織誘導分化出根、莖、葉,最後長成完整的體細胞雜種植株。植物細胞融合技術不僅打破了常規有性雜交育種的親和性障礙,而且為實現“超遠緣雜交”提供了可能,有重大的應用價值。
發展簡史
19世紀30年代,科學家們相繼在肺結核、天花、水痘、麻疹等疾病患者的病理組織中觀察到多核細胞。19世紀70年代,科學家們在蛙的血細胞中也看到了多核細胞的現象,但是由於受當時科學技術發展水平的限制,人們對這一現象並沒有給予足夠的重視;1958年,日本科學家崗田用滅活的仙台病毒誘導人的腹水癌細胞融合成功。後來科學家們又成功地誘導了不同種動物的體細胞融合,並且能將雜種細胞培養成活。隨著細胞融合技術的不斷改進,21世紀以來這項技術已經廣泛應用於細胞學、遺傳學、免疫學、病毒學等多種學科的研究工作中。
通過培養和誘導,兩個或多個細胞合併成一個雙核或多核細胞的過程稱為細胞融合(cell fusion)或細胞雜交(cell hybridization)。
基因型相同的細胞融合成的雜交細胞稱為同核體(homokaryon);來自不同基因型的雜交細胞則稱為異核體(heterokaryon)。
同種細胞在培養時2個靠在一起的細胞自發合并,稱自發融合;異種間的細胞必須經誘導劑處理才能融合,稱誘發融合。
方法原理
誘導細胞融合的方法有三種:生物方法(病毒)、化學方法(聚乙二醇PEG)、物理方法(離心,震動,電刺激)。某些病毒如:仙台病毒、副流感病毒和新城雞瘟病毒的被膜中有融合蛋白(fusion protein),可介導病毒同宿主細胞融合,也可介導細胞與細胞的融合,因此可以用紫外線滅活的此類病毒誘導細胞融合。化學和物理方法可造成膜脂分子排列的改變,去掉作用因素之後,質膜恢復原有的有序結構,在恢復過程中便可誘導相接觸的細胞發生融合。
細胞融合不僅可用於基礎研究,而且還有重要的應用價值,在植物育種方面已經成功的有蘿蔔+甘藍、粉藍菸草+郎氏菸草、番茄+馬鈴薯等等。 而動物細胞融合技術最重要的用途是製備單克隆抗體。
原理:細胞膜具有一定的流動性
意義
突破了有性雜交方法的局限,克服了遠緣雜交的不親和性,使遠緣雜交成為可能,為製造單克隆抗體提供了條件。成為研究細胞遺傳、細胞免疫、腫瘤和生物新品種培育的重要手段。
參考資料
[1] 汪忠.高中生物教科書(現代生物科技專題--選修三).南京市湖南路1號A樓:江蘇鳳凰教育出版社,2019年:65
回覆列表
誘導細胞融合的方法有三種:生物方法(病毒)、化學方法(聚乙二醇PEG)、物理方法(離心,震動,電刺激)。某些病毒如:仙台病毒、副流感病毒和新城雞瘟病毒的被膜中有融合蛋白(fusionprotein),可介導病毒同宿主細胞融合,也可介導細胞與細胞的融合,因此可以用紫外線滅活的此類病毒誘導細胞融合。化學和物理方法可造成膜脂分子排列的改變,去掉作用因素之後,質膜恢復原有的有序結構,在恢復過程中便可誘導相接觸的細胞發生融合。