這兩個字的區別是：字體不同，于是獨體字，於是合體字，左右結構。

於，現代漢語規範一級字（常用字），普通話讀音為yú，最早六書中屬象形字。

“於”字基本含義為超過；引申含義為介詞，如：生於北京。

在日常使用中，“於”還可作後綴，在形容詞後，如：疏於防範；在動詞後，如：屬於未來。

含義不同、作用範圍不同、對象不同。

於和於的不同不是靠的讀音，而是靠字形的不同，古代文人用這兩個不同的字，來表示它們在句子中的不同語法作用。比如，“於”所介多為地名，“於”所介多為被動句。其實，“於”和“於”雖然讀音相同，但字形迥別，“於”就可理解為“從”“到”“向”之類與地名、地點有關的意思，見到“於”就理解為與人有關的被動的意思。所以，“於”和“於”的不同只是用字問題，而非語言問題，雖然只是用字問題，但對書面語的表意是有作用的。所以，二者的不同只表現在書面語中，在口語中則沒有區別。

於與於的區別：

上古“於”和“於”不同音。《尚書》《詩經》一般用“於”，《論語》除引用《尚書》的部分外，不用“於”，《孟子》一般用“於”。

《左傳》兩者並用，如果所介的是地名，一般用“於”，如果在被動句或描寫句裡，一般用“於”，很少例外。 現代漢語中，“於”讀音yú，作介詞及動詞形容詞後綴，也可以作姓；“於”有wū、Yū、yú三種讀音，wū表示感嘆，意義上大致同“嗚”，Yū用作姓，yú則和“於”的意思相同。