一、皰肉培養基法
皰肉培養基法是最簡單的厭氧培養法之一,無需特殊設備。將皰肉和肉湯裝入大試管,在液麵加入凡士林封閉,從而造成無氧環境。在使用前最好將裝有培養基的試管沸水浴10-20min,以使培養基中溶解的氧釋放出來。
二、厭氧罐法
厭氧罐法是目前應用較廣泛的一種厭氧培養方法,是用物理化學的方法使缸內造成厭氧環境,從而進行厭氧菌的培養。厭氧罐法又分為以下兩種:
1、抽氣換氣法
該法適用於一般實驗室,其特點是較經濟,可迅速建立厭氧環境。標本接種後,將平板放入厭氧罐,擰緊蓋子,用真空泵抽出罐中空氣,使壓力真空表至-79.98KPa,停止抽氣,充入高純氮氣使壓力真空表指針回0 位。連續反復3次,最後在罐內-79.98KPa 的情況下,充入70%的N2、20% H2、10% CO2 (或20% CO2、80% H2)。
罐中需放入冷催化劑鈀粒,可催化罐中殘餘的O2和H2化合成水。同時罐中應放有美藍指示管,美藍在有氧的環境下呈藍色,無氧時為紅色。臨用前首先將美藍煮沸使變成無色,放入罐中先呈淺藍色,待罐中無氧環境形成,美藍即可持續無色。
2、氣體發生袋法
氣體發生袋系由錫箔密封包裝,其中含有兩種藥片,一種為含枸椽酸和重碳酸氫鈉的藥片,另一種是含有硼氫化鈉的藥片。前者遇水放出二氧化碳,後者可釋放氫。
使用時在袋的右上角剪一小口,灌進10ml 蒸餾水,立即放入含有鈀粒、指示劑及平板培養基的厭氧罐中,擰緊蓋子。經2-3 分鐘後,可感到蓋子微熱並有少量水蒸氣出現。密封後1小時左右罐中的O2的含量可低於1%。
一、皰肉培養基法
皰肉培養基法是最簡單的厭氧培養法之一,無需特殊設備。將皰肉和肉湯裝入大試管,在液麵加入凡士林封閉,從而造成無氧環境。在使用前最好將裝有培養基的試管沸水浴10-20min,以使培養基中溶解的氧釋放出來。
二、厭氧罐法
厭氧罐法是目前應用較廣泛的一種厭氧培養方法,是用物理化學的方法使缸內造成厭氧環境,從而進行厭氧菌的培養。厭氧罐法又分為以下兩種:
1、抽氣換氣法
該法適用於一般實驗室,其特點是較經濟,可迅速建立厭氧環境。標本接種後,將平板放入厭氧罐,擰緊蓋子,用真空泵抽出罐中空氣,使壓力真空表至-79.98KPa,停止抽氣,充入高純氮氣使壓力真空表指針回0 位。連續反復3次,最後在罐內-79.98KPa 的情況下,充入70%的N2、20% H2、10% CO2 (或20% CO2、80% H2)。
罐中需放入冷催化劑鈀粒,可催化罐中殘餘的O2和H2化合成水。同時罐中應放有美藍指示管,美藍在有氧的環境下呈藍色,無氧時為紅色。臨用前首先將美藍煮沸使變成無色,放入罐中先呈淺藍色,待罐中無氧環境形成,美藍即可持續無色。
2、氣體發生袋法
氣體發生袋系由錫箔密封包裝,其中含有兩種藥片,一種為含枸椽酸和重碳酸氫鈉的藥片,另一種是含有硼氫化鈉的藥片。前者遇水放出二氧化碳,後者可釋放氫。
使用時在袋的右上角剪一小口,灌進10ml 蒸餾水,立即放入含有鈀粒、指示劑及平板培養基的厭氧罐中,擰緊蓋子。經2-3 分鐘後,可感到蓋子微熱並有少量水蒸氣出現。密封後1小時左右罐中的O2的含量可低於1%。