乙肝在研新藥應用RNAi，靶向cccDNA，使抑制成為可能

RNAi，實際上指的是基因沉默，最初這種現象是在植物和秀麗隱杆線蟲（一種無毒無害、可獨立生存線蟲）中被發現的，但後來被證實發生在包括人類在內的高等生物中。基因沉默機制，指的是可以透過mRNA降解或者抑制來實現，也可以透過小干擾RNA（siRNA）、短髮夾RNA（shRNA）和微RNA（miRNA）來實現。

RNAi有一些自身特點，就是它的可逆功能，因為RNA對降解的敏感性，它只提供短暫的治療效果，支援對一些急性疾病而非慢性疾病的治療。然而，RNA的穩定性、對降解敏感性和高效傳遞複雜性等問題，都在早期阻礙著藥企和其他研究機構，對RNAi這項技術的開發熱情！到目前為止，科學家已經證實病毒載體是有效的運載工具，特別是自我複製的RNA病毒載體，可以透過高水平的細胞質RNA擴增，來提供額外的功效。

RNAi在抗病毒藥物開發方向應用

目前，全球關於RNAi抗病毒的應用，主要是基於miRNA的輪狀病毒複製抑制、抑制HBV複製以及基於慢病毒的shRNA靶向HCV複製。所以，這項技術涉及到生物資訊學科，使用RNAi作為靶點選擇工具、載體工程來提供更有效、更安全的病毒載體，以及高安全標準和治療效果的與遞送相關問題。目前，生物資訊學在基於RNAi的抗病毒藥物研發中，起到重要作用，其中包括：

透過靶向HIV反式啟用反應區和實驗測試的siRNA/shRNA序列來說明，還針對HIV、HCV、流感病毒以及SARS-CoV保守區的siRNA都已經被設計出來。雖然，生物資訊學能夠在體外和體內研究前，為siRNA的有效性預測和電子測試提供一個較好方法，但由於HCV基因組從一級序列到三級結構特性，RNA結構可能會對基於RNA的HCV治療施加限制。

RNAi在乙肝在研新藥領域研究

以2020年10月20日研究人員Kenneth Lundstrom發表在科學雜誌《Viruses》的一份研究為例，就對RNAi應用在HBV新藥研發作出詳細介紹。研究人員認為，目前透過RNAi以解決HBV複製的思路主要包括RNAi途徑、RNAi啟用劑、siRNA設計或合成以及化學修飾（觀點來自：Viruses），這些或許可以提供國內科研人員一些值得借鑑的研發思路。

另外，研究人員還著重介紹了，以RNA干擾為基礎，靶向乙肝病毒共價閉合環狀DNA（cccDNA）抑制乙肝病毒複製的可能性。在以病毒載體為基礎的傳遞過程中，肝細胞轉導對乙肝病毒的沉默至關重要。例如，研究人員Kenneth Lundstrom認為，ad載體通常提供短期表達，慢病毒已經證明了肝細胞轉導的低效率以及與染色體整合後，癌基因啟用有關的問題。

相比之下，AAV已成為一個很好的候選者，尤其是嗜肝性的AAV8血清型。自互補AAV（scAAVs）提供更快的轉基因表達，並已被證明適合於攜帶抗HBVRNAi表達盒。單劑量1×1011 scAAV8抗HBV複製品，可抑制轉基因小鼠的HBV複製至少10個月。上述研究資料表明，RNAi在抗病毒藥物開發中的具有潛力。