"基於血液的cfDNA靶向甲基化標記物檢測擁有較高的靈敏度和特異性，具有肺癌早篩、早診的潛力！"

在全球範圍內，肺癌是導至癌症死亡的主要原因，作為全球主要的公共衛生問題已成為研究的重點。儘管手術，化療，靶向及免疫治療的綜合應用顯著提高了肺癌的生存率，但是與其他癌症相比，肺癌患者的預後仍然相對較差。一個主要因素就是，大部分肺癌是在晚期被診斷出來的，這與缺乏普及的肺癌早期篩查有關。

提高肺癌生存率最有效的方法是二級預防，即早篩查、早診斷和早治療，篩查是早期發現肺癌和癌前病變的重要途徑。

現在，肺癌的早篩方法主要是依靠影像學（X線胸片和胸部CT），X線胸片雖然具有穿透力高、使用方便、輻射劑量小的特點，但解析度低，很難發現直徑＜5～6mm的病變，且存在死角，臨床不建議用於肺癌的篩查。胸部低劑量CT（LDCT）篩查目前是國際公認的檢測肺結節和早期診斷肺癌的最有效方法，然而，由於其高靈敏度，也檢測到許多非腫瘤性肺結節，假陽性結節的大量檢出是LDCT篩查亟需解決的重要問題，需要其他篩查手段加以補充。

近年來，表觀遺傳學、液體活檢和生物標記物等肺癌檢測技術的進步，使肺癌早篩成為了可能。DNA甲基化異常是驅動癌症發生發展的重要表觀遺傳修飾之一。研究發現，在不同的腫瘤階段，DNA甲基化位置和甲基化水平存在差異，而異常的DNA甲基化是腫瘤的特徵之一。先前已報道甲基化是肺腺癌發生中的早期分子事件。近年來，隨著DNA甲基化分析技術和臨床轉化研究的突破，DNA甲基化檢測可以作為一種腫瘤早篩和早診的新技術。

2021年1月28日~31日，2020世界肺癌大會（WCLC）以線上虛擬的方式隆重召開，期間發表的一項肺癌早篩研究結果顯示：基於血液的非侵入性cfDNA靶向甲基化檢測可以早期檢測和鑑別肺癌，且具有很高的靈敏度和特異性！

【肺癌的問題】在全球範圍內，肺癌是導至癌症死亡的主要原因，晚期轉移性肺癌的5年生存率為6%，區域性尚未擴散肺癌的5年生存率為59%。肺癌早篩確實可以挽救生命，但目前的篩查方法通常準確性較低，且當前篩查僅針對高風險患者，但低風險患者病例卻正在上升。

【癌症發生的早期指標】既往的研究顯示，DNA甲基化是癌症篩查的“理想”生物標誌物（表觀遺傳學變化確實可以影響健康）。DNA甲基化異常是癌症/複雜疾病發生的早期事（指）件（標），影響病程和藥物反應，具有組織特異性（癌症特異性），是一種遺傳模式，化學上與DNA一樣穩定，血漿中可穩定檢測（如血漿cfDNA（ctDNA））。

【研究方法】研究者從西班牙和美國的108名接受常規檢查或腫瘤科治療的患者中收集8ml血漿用於檢測分析。肺癌患者必須有明確的癌症診斷，包括組織學和分期資訊（37名肺癌患者，11名肺腺癌，11名肺鱗癌，9名小細胞肺癌，6名罕見肺癌亞型）；對照患者為無症狀患者，無已知診斷癌症和病史（71名無症狀患者）。兩組年齡（59歲 vs 60歲），性別（男性 25% vs 35%）和吸菸史（現在吸菸/過往吸菸史，從不吸菸，未知）相互匹配對照。

研究者從TCGA專案中挖掘了人類甲基化450K晶片的可用資料用於最初生物標誌物的篩選。採用甲基化敏感性限制性內切酶-定量PCR（MSRE-qPCR）方法用於檢測血漿cfDNA中感興趣的區域。此外，使用ΔCt值進行進一步分析。為了構建和檢測標記的panel（10-甲基化標記物panel），研究人員使用了隨機森林特徵選擇演算法，該演算法的開發使用了超過50次蒙特卡洛交叉驗證。為了衡量準確性，研究人員研究了正確call出的比例（精確度）。

【研究結果】結果顯示，10-甲基化標誌物panel的總體靈敏度為73%，特異性為90%。此外，I期的檢測靈敏度可達73%，II期的檢測靈敏度為75%，III期的檢測靈敏度為77%；對主要組織亞型的檢測具有良好的靈敏度，對肺腺癌亞型的檢測靈敏度為82％，對肺鱗癌亞型的檢測靈敏度為80％，對SCLC的檢測靈敏度為73％，對其他罕見肺癌亞型的檢測靈敏度為40％。

根據Preasons相關試驗，10-甲基化標誌物panel與主要臨床/生理特徵（如吸菸史）無關（p >0.05）；發現某些單一標記物具有明顯的判別力（p >0.05）。【檢測的10個標記物的生物學相關性：如THBD透過與纖維連線蛋白相互作用增強細胞粘附、遷移和FAK啟用來促進血管生成】

【研究結論】

✦ 靶向甲基化標記物檢測具有較高的靈敏度和特異性，具有早期基於血液檢測肺癌的潛力；

✦ 甲基化標記panel對主要肺癌組織學亞型的檢測具有良好的準確性；

✦ 甲基化標記panel的表現與患者的吸菸史無關；

✦ 該方法可作為進一步開發面向更廣泛人群的高精度和微創血液篩查試驗的基礎。