基於成體幹細胞的類器官技術是一種多用途工具，用於在體外構建和長期維持近天然的三維上皮組織。從原發性病人組織中構建的癌症類器官使一系列治療藥物能夠在接近人體生理性質的類器官培養物中進行測試。因此，從病人身上提取的癌症類器官有望成為個性化醫療的基石。本文中，研究人員概述了不同的課題組從不同種類上皮組織和癌症中建立類器官的方案，以及用於測試這些患者來源的類器官在體外治療中藥物敏感性的差異。研究人員還提供了一套頭頸部鱗狀細胞癌類器官的構建及其在半自動治療篩選中後續應用的深入方案。雖然這個時間高度依賴於起始材料和試驗療法的數量，但有機體的建立和隨後的篩選可以在3個月內完成。所提供的方案可作為成功建立其他型別癌症的類器官和進行其藥物篩選的參考。

Y-27632是一種選擇性的ROCK1(p160ROCK)抑制劑，Ki為140 nM，比對其他激酶包括PKC，cAMP依賴性蛋白激酶， MLCK和PAK的作用強200多倍。在類器官的分裂和傳遞步驟中，採用了Y-27632。尤其是處理囊狀或葡萄狀的細胞器培養物時，可以用機械剪下代替傳代培養。傳代後直接在培養基中加入Y-27632，以保證有機體的正常生長。

Y-27632 2HCl是一種選擇性的ROCK1(p160ROCK)抑制劑，Ki為140 nM，比對其他激酶包括PKC，cAMP依賴性蛋白激酶， MLCK和PAK的作用強200多倍。Y-27632也同等有效抑制ROCK-II。Y-27632作用於PKC, cAMP依賴的蛋白激酶和 肌球蛋白輕鏈激酶(MLCK)幾乎沒有活性，Ki分別為26 μM, 25 μM, 和 > 250 μM。Y-27632透過選擇性抑制Ca2+敏感化，而抑制多種興奮劑而不是KCl，包括Phenylephrine, Histamine, Acetylcholine, Serotonin, Endothelin,和Thromboxane誘導的平滑肌收縮，IC50為0.3-1 μM。

鳴謝：Driehuis E , Kretzschmar K , Clevers H . Establishment of patient-derived cancer organoids for drug-screening applications[J]. Nature Protocols.