除了上期介紹組蛋白乙醯化以外，乙肝病毒複製模板cccDNA結合的組蛋白上，存在啟用與抑制甲基化標記，也會決定這個HBV複製模板的活性。到目前為止，全球科研人員觀察到，存在這種抑制性標記不一定和乙肝病毒轉錄降低相關，這也表明體記憶體在更為複雜的表觀遺傳作用。

乙肝在研新藥硝唑尼特，直接靶向cccDNA，II期聯合研究

比如說，和此前已經做過的體外感染研究結果相反，全球科研人員在HBV基因組轉染24小時後，cccDNA被觀察發現處於轉錄抑制狀態，即病毒啟動子上的H3低乙醯化和賴氨酸9甲基化。乙肝病毒調控蛋白HBx，它主要透過召集組蛋白去甲基化酶賴氨酸特異性去甲基化酶-1 (LSD1)和包含1A的KMT集結構域(Set1A)到病毒啟動子來克服這種抑制。上述介紹內容，同樣也屬於全球科研人員正在進行的工作，即正向地調節宿主cccDNA活性。

在它們當中，有些條件可以直接抑制cccDNA活動，導致乙肝病毒複製下降。硝唑尼特，它被美國FDA批准用於治療多種病毒和寄生蟲感染藥物，不過全球已有科研人員提出，硝唑尼特可能將被重新用於治療HBV感染的一種新藥物。因為正是基於在硝唑尼特發現，上述直接抑制cccDNA活性的限制宿主因素：Smc5/6。

雖然，硝唑尼特正在用於HBV感染的臨床研究正在進行，但科研人員指出了硝唑尼特可抑制HBx與DDB1之間的相互作用，進而恢復Smc5/6的表達，最終導致乙肝病毒轉錄降低。考慮到Smc5/6的泛素依賴性降解，也需要NEDD8蛋白，所以如Pevonedistat (MLN4924），也能夠阻止Smc5/6降解，因為它被證明可以抑制NEDD8啟用酶E1。

2020年1月23日更新於全球臨床試驗資料庫，硝唑尼特治療成人慢性HBV感染（乙肝e抗原陰性者）的第2期臨床試驗已經啟動（NCT03905655）。這一項臨床研究納入48名受試者，按照隨機1:1:1:1（每組12名受試者），評價3種不同的硝唑尼特（NTZ）方案，加用TDF、TAF或ETV的安全性、有效性及藥代動力學-藥效學。

這項第2期臨床試驗，預計會在2022年12月1日完成。所以，全球科研人員對硝唑尼特的新探索，也是主要基於它在直接靶向病毒模板cccDNA是可行的，因而啟動臨床研究。關於硝唑尼特（NTZ）的詳細臨床試驗研究方法、試驗資料等，可查詢往期介紹。當前，硝唑尼特還沒有被證明可用於治療HBV感染，只在科研用途使用。