Hypochlorite-induced aggregation of fibrinogen underlies a novel antioxidant role in blood plasma.
摘要纖維蛋白原是血漿的主要成分，極易與生物氧化劑發生反應。有人提出，纖維蛋白原在抗氧化防禦中發揮作用，但纖維蛋白原的氧化也被認為破壞正常的血液凝塊，並與動脈粥樣硬化的病理有關。在本研究中，我們發現生物氧化劑次氯酸鹽能促進可溶性高分子量纖維蛋白原的形成，≥40 × 106da，當纖維蛋白原在體外受到加熱或羥基介導的損傷誘導聚集時，這些聚集不會聚集。根據沉澱分析，次氯酸鹽修飾的纖維蛋白原在37°C時是穩定的，與天然纖維蛋白原相比，它降低了鐵誘導(羥基介導)沉澱的敏感性。與已知具有免疫刺激作用的次氯酸修飾白蛋白相比，次氯酸修飾的纖維蛋白原不會誘導RAW 264.7(巨噬細胞樣)細胞或EOC 13.31(小膠質細胞樣)細胞產生活性氧或誘導細胞死亡。此外，在人血漿中新增次氯酸鹽後，纖維蛋白原的減少增加了血漿的免疫刺激特性。我們認為，次氯酸鹽與血漿中的纖維蛋白原反應可能會減少其他次氯酸鹽修飾的物種的積累，如免疫刺激性次氯酸鹽修飾白蛋白。後者代表了纖維蛋白原在血漿抗氧化防禦中的新作用。
關鍵詞蛋白質錯摺疊、氧化應激、抗氧劑、發炎、血、血漿蛋白。
結果圖1：SDS-PAGE凝膠影象顯示NaOCl對純化人纖維蛋白原的影響 Western blot分析NaOCl處理人血漿中的纖維蛋白原
圖2：原生PAGE凝膠影象顯示NaOCl對纖維蛋白原、α2M、白蛋白和CPK遷移的影響。
圖3：NaOCl處理纖維蛋白原的尺寸排斥色譜、雙反式分析和圓二色譜分析。
圖4：濁度測定顯示NaOCl對熱致纖維蛋白原沉澱的影響。
圖 5：天然凝膠濁度測定及影象顯示NaOCl誘導的改性對Fe的影響3Cl誘導纖維蛋白原沉澱。
圖6：流式細胞儀分析表明，NaOCl對白蛋白、纖維蛋白原、人血漿或Fd所致細胞ROS產生的影響。
圖7：流式細胞儀分析顯示NaOCl對纖維蛋白原與264.7細胞表面結合的影響。
談論考慮到炎症反應中纖維蛋白原水平的升高是一種進化上保守的反應，合理的說法是，纖維蛋白原是在氧化應激的存在下發揮作用的。儘管如此，有關纖維蛋白原氧化是否有益或有害的爭論仍在現場進行，有證據表明有促進血栓形成和抗血栓形成的作用。這項具有里程碑意義的研究為闡明次氯酸鹽修飾的纖維蛋白原的生物學重要性提供了重要的一步。與纖維蛋白原作為一種抗氧化劑的重要作用一致，我們的研究結果支援了以下結論：纖維蛋白原對次氯酸鹽誘導的聚集具有獨特的敏感性，在正常生理相關溫度下不促進其沉積，或賦予刺激免疫細胞活性氧生成的能力。然而，有道理的是，次氯酸鹽修飾的纖維蛋白原有重要的細胞後果，目前還不清楚。總之，他的研究結果強調，為了瞭解纖維蛋白原在健康和疾病中的不同生物學作用，必須考慮個別生物氧化劑的具體作用。