細胞培養(cell culture)是指在體外模擬體內環境(無菌、適宜溫度、酸鹼度和一定營養條件等),使之生存、生長、繁殖並維持主要結構和功能的一種方法。細胞培養也叫細胞克隆技術,在生物學中的正規名詞為細胞培養技術。不論對於整個生物工程技術,還是其中之一的生物克隆技術來說,細胞培養都是一個必不可少的過程,細胞培養本身就是細胞的大規模克隆。細胞培養技術可以由一個細胞經過大量培養成為簡單的單細胞或極少分化的多細胞,這是克隆技術必不可少的環節,而且細胞培養本身就是細胞的克隆。細胞培養技術是細胞生物學研究方法中重要和常用技術,透過細胞培養既可以獲得大量細胞,又可以藉此研究細胞的訊號轉導、細胞的合成代謝、細胞的生長增殖等。
1、科學研究:藥物研究開發與基礎研究
藥物研究與開發:新藥篩選、疫苗
研究與開發、基因工程藥物研究與開發、細胞工程藥物研究與開發、單克隆抗體製備
基礎研究:藥物作用機理、基因功能、疾病發生機理
2、 生物製藥:疫苗生產、基因工程藥物生產、診斷用和藥用單克隆抗體生產、細胞工程藥物生產細胞培養基本條件
3、合適的細胞培養基合適的細胞培養基是體外細胞生長增殖的最重要的條件之一,培養基不僅提供細胞營養和促使細胞生長增殖的基礎物質,而且還提供培養細胞生長和繁殖的生存環境。
細胞培養基的種類很多,按其來源分為合成培養基和天然培養基(目前使用的培養基絕大部分是合成培養基),按其物質狀態分為乾粉培養基和液體培養基兩類。乾粉培養基需由實驗者自己配製並滅菌,液體培養基由專業商家提供,使用者可直接使用,非常方便。每種細胞都有其合適的培養基培養基:MEM、DMEM、 IMDM、 RPMI-1640、F12、F12K (具體細胞用什麼培養基要以細胞說明書為準,每一種細胞的培養基都是不一樣的)。
液體培養基儲存:
液體培養基儲存: 4℃冰箱避光儲存,實驗前放入 37℃預熱。未加血清液體培養基有效期為 12 個月。液體培養基中的 L- 谷氨醯胺會隨著儲存時間的延長而慢慢分解。如果細胞生長不良,可以再新增適量 L- 谷氨醯胺。
乾粉培
養基儲存:4℃冰箱避光儲存,有效期 36 個月。
目前,市場上可提供乾粉培養基和液體培養基。乾粉培養基需使用者自己配製並滅菌,其優點是價格便宜。缺點是配製過程繁瑣,質量不易控制。液體培養基是由專業產家按標準規模化生產,不僅質量得到保證,而且使用十分方便。
養細胞要用好血清!