一種卵生動物的克隆方法

2016.11.12

生化發明申請專利需要提供實驗資料，所以單純的理論不會授予專利。

技術領域：

本發明涉及一種卵生動物的克隆方法

背景技術：

克隆通常是一種人工誘導的無性生殖方式或者自然的無性生殖方式（如植物）。一個克隆就是一個多細胞生物在遺傳上與另外一種生物完全一樣。克隆技術又稱為“生物放大技術”，它經歷了三個發展時期：第一個時期是微生物克隆時期，即用一個細菌可以很快複製出成千上萬個和它一模一樣的細菌，從而變成一個細菌群；第二個時期是生物技術克隆時期，比如用遺傳基因——DNA進行克隆；第三個時期是動物克隆時期，即由一個細胞克隆成一個動物。克隆綿羊“多莉”就是由一頭母羊的體細胞克隆而來，使用的便是動物克隆技術。

克隆技術發明內容：

（1）目的：

本發明目的在於，透過一種簡單設計，實現卵生動物的克隆，增加經濟生物的產量與質量，保護稀有卵生動物，如鳥類，爬行類動物等。

（2）技術方案：

本發明，一種卵生動物的克隆方法。首先，獲得待克隆卵生動物的DNA片段（基因），如獲得兩個卵細胞的遺傳物質，並使之結合成一個具備完整結構的細胞核；接著，透過處理相同物種的卵，將其去殼，並用已經獲得的具備完整結構的細胞核取代去殼卵細胞的DNA，最後，再將這個卵細胞放入容器進行孵化。

（3）有益效果：

本發明與現有技術相比較，現有克隆多是對哺乳動物，透過母體進行克隆，對鳥類和爬行動物等沒有相關介紹，本發明方法只是提供一種途徑。

（4）具體實施方式：

如雞的克隆方法，步驟1，將兩枚未受精卵的DNA遺傳物質③取出，合在一起，形成具有完整結構的細胞核DNA物質③，或者取得具有活性的雞的體細胞；步驟 2，再將一枚雞卵去殼，用步驟1獲取的DNA③取代卵黃②上的原有NDA物質③；步驟3，將步驟2獲得的雞卵進行孵化。在杯口適當大小的杯子裡放少許水，將保鮮膜懸於杯口，形成凹槽，將步驟2獲得的雞卵放入保鮮膜凹槽中，在之上覆蓋保鮮膜，杯子的水是為了保持溼度，保證蛋清①處在適宜的溼度下，整個過程要保持無菌狀況。再將杯子裡保鮮膜中的雞卵放入孵化箱中，最終孵化出小雞。

具體技術細節：

1. 一種卵生動物的克隆方法，包括未受精產出的帶殼動物卵，以及由此技術孵化的相關動物。

2. 一種卵生動物的克隆方法，卵是帶殼的，且未受精，並且卵內蛋白質具有活性的卵。卵可以是鳥類或者爬行動物的卵。

3. 一種卵生動物的克隆方法，要獲得與卵相同動物的核細胞（不同種動物的試驗可能困難更多，成功率更低），或者透過卵細胞、體細胞的DNA合成完整的細胞核。

4. 一種卵生動物的克隆方法，步驟如下：首先，獲得待克隆卵生動物完整的細胞核，比如獲得兩個卵細胞的DNA遺傳物質，並使之結合成一個具備完整結構的細胞核；接著，透過處理相同物種的未受精卵，將其去殼，並用已經獲得的具備完整結構的細胞核取代去殼卵細胞的DNA，最後，再將這個卵細胞放入孵化器進行孵化。

5.一種卵生動物的克隆方法去殼過程為無菌的情況下，包括無菌環境和無菌裝置、器皿。卵的去殼過程，先小刀或者金屬鑷子在卵外殼製造細小裂縫，透過用注射針管針頭注入生理鹽水，將殼與內膜分離，將外殼用鑷子沿裂口夾碎取下，露出完整的帶內膜卵。接著將去殼卵放入大小適宜的覆蓋有塑膠薄膜的無菌器皿，用鑷子和手術刀在卵膜表面切十字口，用兩個鑷子沿著十字口將卵膜撕開，輕輕傾斜玻璃器皿，將卵膜取出，僅留下無殼無膜的卵。

6. 一種卵生動物的克隆方法，在獲得無殼、無內膜的卵後，兜住塑膠薄膜取出包裹在塑膠薄膜的卵，將其置於裝有適量清水的大小合適的水杯裡，塑膠薄膜邊緣置於水杯口外，透過橡皮圈使其固定，盛放於塑膠薄膜的卵在水杯的水面之上，以保證孵化期間卵周圍環境的溼潤。將另外一塊塑膠薄膜覆蓋於杯口，形成水杯類似於外殼，塑膠薄膜類似於卵內膜的狀態。最後將裝有去殼卵的水杯放入適宜條件的孵化器內進行孵化，並可不間斷觀察其發育情況，直至獲得克隆的動物。

“無殼孵化小雞”：

模擬蛋殼的條件。雖說一個雞蛋最重要的就蛋黃和蛋清，蛋殼並不是必要條件。但是蛋殼是起了很大的作用的，比如說隔離細菌，使蛋殼內部形成一個無菌的密閉空間，保持溫度、溼度等。

模擬蛋殼條件

首先，我們需要準備一個透明杯子，在杯子內加入少量抑菌水，防止細菌的誕生。之後在茶缸中塑造一個類似於蛋殼形狀的保鮮膜製成的透明容器，將完整無損的雞蛋液放在裡面，這樣做的主要目的是讓蛋黃在蛋清中均勻的受力。這個時候需要在這個容器中加入一些碳酸鈣，用以替補原本小雞在發育過程中蛋殼對鈣的補充。最後需要在保鮮膜的邊緣紮上一些小洞，模擬原本蛋殼中的透氣小孔。最後，把眼前這個承載著生命的杯子，放進恆溫箱，靜靜等待21天。

專案是在此技術基礎之上進行胚胎移植、培養實驗。