一種卵生動物的克隆方法
2016.11.12
生化發明申請專利需要提供實驗資料,所以單純的理論不會授予專利。
技術領域:
本發明涉及一種卵生動物的克隆方法
背景技術:
克隆通常是一種人工誘導的無性生殖方式或者自然的無性生殖方式(如植物)。一個克隆就是一個多細胞生物在遺傳上與另外一種生物完全一樣。克隆技術又稱為“生物放大技術”,它經歷了三個發展時期:第一個時期是微生物克隆時期,即用一個細菌可以很快複製出成千上萬個和它一模一樣的細菌,從而變成一個細菌群;第二個時期是生物技術克隆時期,比如用遺傳基因——DNA進行克隆;第三個時期是動物克隆時期,即由一個細胞克隆成一個動物。克隆綿羊“多莉”就是由一頭母羊的體細胞克隆而來,使用的便是動物克隆技術。
克隆技術發明內容:
(1)目的:
本發明目的在於,透過一種簡單設計,實現卵生動物的克隆,增加經濟生物的產量與質量,保護稀有卵生動物,如鳥類,爬行類動物等。
(2)技術方案:
本發明,一種卵生動物的克隆方法。首先,獲得待克隆卵生動物的DNA片段(基因),如獲得兩個卵細胞的遺傳物質,並使之結合成一個具備完整結構的細胞核;接著,透過處理相同物種的卵,將其去殼,並用已經獲得的具備完整結構的細胞核取代去殼卵細胞的DNA,最後,再將這個卵細胞放入容器進行孵化。
(3)有益效果:
本發明與現有技術相比較,現有克隆多是對哺乳動物,透過母體進行克隆,對鳥類和爬行動物等沒有相關介紹,本發明方法只是提供一種途徑。
(4)具體實施方式:
如雞的克隆方法,步驟1,將兩枚未受精卵的DNA遺傳物質③取出,合在一起,形成具有完整結構的細胞核DNA物質③,或者取得具有活性的雞的體細胞;步驟 2,再將一枚雞卵去殼,用步驟1獲取的DNA③取代卵黃②上的原有NDA物質③;步驟3,將步驟2獲得的雞卵進行孵化。在杯口適當大小的杯子裡放少許水,將保鮮膜懸於杯口,形成凹槽,將步驟2獲得的雞卵放入保鮮膜凹槽中,在之上覆蓋保鮮膜,杯子的水是為了保持溼度,保證蛋清①處在適宜的溼度下,整個過程要保持無菌狀況。再將杯子裡保鮮膜中的雞卵放入孵化箱中,最終孵化出小雞。
具體技術細節:
1. 一種卵生動物的克隆方法,包括未受精產出的帶殼動物卵,以及由此技術孵化的相關動物。
2. 一種卵生動物的克隆方法,卵是帶殼的,且未受精,並且卵內蛋白質具有活性的卵。卵可以是鳥類或者爬行動物的卵。
3. 一種卵生動物的克隆方法,要獲得與卵相同動物的核細胞(不同種動物的試驗可能困難更多,成功率更低),或者透過卵細胞、體細胞的DNA合成完整的細胞核。
4. 一種卵生動物的克隆方法,步驟如下:首先,獲得待克隆卵生動物完整的細胞核,比如獲得兩個卵細胞的DNA遺傳物質,並使之結合成一個具備完整結構的細胞核;接著,透過處理相同物種的未受精卵,將其去殼,並用已經獲得的具備完整結構的細胞核取代去殼卵細胞的DNA,最後,再將這個卵細胞放入孵化器進行孵化。
5.一種卵生動物的克隆方法去殼過程為無菌的情況下,包括無菌環境和無菌裝置、器皿。卵的去殼過程,先小刀或者金屬鑷子在卵外殼製造細小裂縫,透過用注射針管針頭注入生理鹽水,將殼與內膜分離,將外殼用鑷子沿裂口夾碎取下,露出完整的帶內膜卵。接著將去殼卵放入大小適宜的覆蓋有塑膠薄膜的無菌器皿,用鑷子和手術刀在卵膜表面切十字口,用兩個鑷子沿著十字口將卵膜撕開,輕輕傾斜玻璃器皿,將卵膜取出,僅留下無殼無膜的卵。
6. 一種卵生動物的克隆方法,在獲得無殼、無內膜的卵後,兜住塑膠薄膜取出包裹在塑膠薄膜的卵,將其置於裝有適量清水的大小合適的水杯裡,塑膠薄膜邊緣置於水杯口外,透過橡皮圈使其固定,盛放於塑膠薄膜的卵在水杯的水面之上,以保證孵化期間卵周圍環境的溼潤。將另外一塊塑膠薄膜覆蓋於杯口,形成水杯類似於外殼,塑膠薄膜類似於卵內膜的狀態。最後將裝有去殼卵的水杯放入適宜條件的孵化器內進行孵化,並可不間斷觀察其發育情況,直至獲得克隆的動物。
“無殼孵化小雞”:
模擬蛋殼的條件。雖說一個雞蛋最重要的就蛋黃和蛋清,蛋殼並不是必要條件。但是蛋殼是起了很大的作用的,比如說隔離細菌,使蛋殼內部形成一個無菌的密閉空間,保持溫度、溼度等。
模擬蛋殼條件
首先,我們需要準備一個透明杯子,在杯子內加入少量抑菌水,防止細菌的誕生。之後在茶缸中塑造一個類似於蛋殼形狀的保鮮膜製成的透明容器,將完整無損的雞蛋液放在裡面,這樣做的主要目的是讓蛋黃在蛋清中均勻的受力。這個時候需要在這個容器中加入一些碳酸鈣,用以替補原本小雞在發育過程中蛋殼對鈣的補充。最後需要在保鮮膜的邊緣紮上一些小洞,模擬原本蛋殼中的透氣小孔。最後,把眼前這個承載著生命的杯子,放進恆溫箱,靜靜等待21天。
專案是在此技術基礎之上進行胚胎移植、培養實驗。