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基因擴增實驗室又稱PCR實驗室,其特點是能將微量的DNA大幅增加,PCR是分子生物學研究和實驗的常規方法,廣泛應用於生物學各個領域。例如:艾滋病檢測、乙型肝炎、禽疫病、癌基因的檢測和診斷,DNA指紋、個體識別、親子鑑定及法醫物證、動植物檢疫,動物及其衍生產品檢測,動物飼料、化妝品、食品衛生檢測,轉基因作物與轉基因微生物檢測等。

  一、PCR實驗室裝修知識

  1.普通實驗區:包括產物分析區、擴增區、標本製備區、試劑準備區這四個區域。

  2.汙染控制區:此區域的規劃有三套方案,第一套為各功能間相互串通,以套間方式進入人流/物流。第二套為設定獨立緩衝間,人流/物流分道,流程相鄰間設定物流傳遞窗。第三套為設定共用緩衝間/緩衝走廊。

  3.氣流組織:PCR實驗室裝修的氣流組織需要從原始試劑混配室、DNA提取室、PCR擴增室、檢測室、送風口這五方面來考慮。

  ①原始試劑混配室:房間壓差為正壓,配備有潔淨工作臺,以防止其他功能間對本房間的汙染。

  ②DNA提取室:房間壓差為負壓,配備有排風系統,以防止提取核酸產生的氣溶膠對工作人員的傷害及擴散汙染。

  ④檢測室:房間壓差為負壓,與DNA提取室、PCR擴增室一樣,配備有排風系統,以防止相關汙染。

  ⑤送風口:採用的是頂送風,側下回/排風方式。

  二、PCR實驗室設計知識

  1.PCR走廊:走廊不是標配,進深不夠時不要做PCR走廊,但PCR走廊會增加交叉汙染。

  這四個分割槽(試劑儲存和準備區、標本製備區、核算擴增區、產物分析區)原本就不需連線在一起。且在物理空間上必須是完全相互獨立的,各區域無論在空間上還是在使用中,應當始終處於完全的分隔狀態,不能有空氣的直接相通。

  2.傳遞窗:並非必須設定(只要不涉及潔/汙分流就不需要設定傳遞窗),但一般實驗機構/實驗人員喜歡設定。

  傳遞窗的本質為緩衝間,是物流的緩衝間。在PCR實驗室設計中,試劑準備和標本製備間是重點保護的區域,此處最好不要加傳遞窗,防止交叉汙染。實驗中的汙染風險主要來自於核酸擴增時的加氧行為,但由於操作在生物安全櫃內進行,且確保空氣不外溢,因此不存在汙染。

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