甘草多糖提純後,成為非特異免疫原性新物質。在研發過程中,投入市場應用前,透過動物中實驗觀察到甘草多糖抗病毒作用。
實驗由天津醫科大學微生物教研室進行。
實驗材料與方法:由於病毒只能在活的細胞內生長,選用小鼠傳代纖維母細胞培養病毒。
病毒則以呼吸道病毒——腺病毒,腸道病毒——柯薩奇病毒做實驗。
每種病毒分四個組,甘草多糖分為1:4、1:8、1:16、1:32四個稀釋度,稀釋度越高,含甘草多糖量越低。
甘草多糖對細胞毒性測定
病毒在組織細胞生長對照
甘草多糖是否對細胞具有毒性,細胞是否適於病毒生長,都應該先做預試驗,以保證正式實驗結果的可靠性。
在細胞液中加入不同稀釋度甘草多糖,培養48小時後觀察,結果細胞形態正常均無變化。
病毒在細胞液中生長良好,均出現細胞病變。
結果解讀:表一、甘草多糖對細胞的毒性作用測定、病毒在細胞中生長對照
從表一可明顯看出,甘草多糖不同稀釋度溶液對細胞均無毒性。對照病毒生長良好,細胞適宜病毒生長。
據此,可進行正式實驗。
分組實驗
1組:在細胞中,先加入不同稀釋度甘草多糖液,24小時後吸出甘草多糖液,加入病毒液。
2組:在細胞中,先加入病毒液,1小時後,洗去病毒液,加入不同稀釋度甘草多糖液。
3組:不同稀釋度甘草多糖液與病毒液同時加入細胞液中。
4組:不同稀釋度甘草多糖液與病毒液混合,放置37℃培養2小時後,再加入細胞液中。
相同的分組與相同的方法,分別對腺病毒、柯薩奇病毒做了實驗觀察。
表二、甘草多糖對腺病毒感染保護率(%)
表三、甘草多糖對柯薩奇病毒感染保護率(%)
從表二、表三可看出,甘草多糖對腺病毒、柯薩奇病毒均有阻止病毒進入細胞造成感染的功能作用。
還觀察到,甘草多糖對這兩種病毒均有直接的滅活作用(即殺滅病毒)。
呼吸道病毒和腸道病毒,都是經常感染人的致病病毒,而且對於病毒目前還缺乏理想的高效治療藥物。
腺病毒是一群多型的病毒,主要經上呼吸道侵入人體,也可經眼結膜侵入,引起的疾病包括:急性上呼吸道感染、急性喉炎、咽結膜熱、流行性角膜結膜炎、非典型肺炎等症。侵犯兒童和中老年人。
柯薩奇病毒是一群多型的病毒,主要透過腸道感染,可引起無菌性腦膜炎、流行性胸痛、夏季感冒、咽峽炎、心肌炎、麻痺症等。這群病毒對外環境的抵抗力較強。