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SD是含有鹽類、微量元素、維生素、氮源(不含氨基酸的酵母氮鹼)和葡萄糖的合成基本培養基。
注意:氮源(不含氨基酸的酵母氮鹼)是這種培養基用於篩選的關鍵,LB,YPD這種複合培養基因為用到了酵母提取物,蛋白腖,基本是氮源全營養的,肯定是不能用來做氮源篩選的=============================================================
(2)SD培養基配方及配置方法:
注意,配置SD培養基必須先要知道你所用到的宿主酵母的基因型,至少要知道你用的酵母菌有哪些氨基酸缺陷。以我唯一接觸過的釀酒酵母為例
步驟/方式1
LB培養基的配方如下:
胰蛋白腖(Tryptone) 10g/L;
酵母提取物(Yeast extract) 5g/L;
氯化鈉(NaCl) 10g/L
另外根據經驗值用NaOH調節該培養基的pH,使其達到7.4(該pH適合目前使用最廣的原核表達菌種E.coli的生長)
LB培養基是一種培養基的名稱,生化分子實驗中一般用該培養基來預培養菌種,使菌種成倍擴增,達到使用要求.可分為液體培養基和固體培養基。
步驟/方式2
液體LB 培養基 每升10g 胰化蛋白腖 (Tryptone)5g 酵母提取物(Yeast extract)5g NaCl1ml 1mol/L NaOH調pH至7.4用去離子水定容至1L.高壓下蒸汽滅菌20min.固體LB平板培養基 每升10g 胰化蛋白腖 (Tryptone)5g 酵母提取物(Yeast extract)5g NaCl15g瓊脂或者瓊脂糖1ml 1mol/L NaOH調pH至7.4用去離子水定容至1L.高壓下蒸汽滅菌20min.氨苄青黴素濃度為Amp 50~100ug/ml,培養基高壓滅菌後再加入。氨苄青黴素儲存液的濃度為4mg/ml
LB 培養基配製
液體LB 培養基 每升
10g 胰化蛋白腖 (Tryptone)
5g 酵母提取物(Yeast extract)
5g NaCl
1ml 1mol/L NaOH調pH至7.4用去離子水定容至1L.高壓下蒸汽滅菌20min.
固體LB平板培養基 每升
10g 胰化蛋白腖 (Tryptone)
5g 酵母提取物(Yeast extract)
5g NaCl