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  • 1 # 用戶1884099433802

    RNA的Brachet實驗是經典的分離RNA組分的方法,其主要步驟如下:

    1. 研磨細胞:首先用鹽水沖洗細胞,然後用冰涼的異丙醇將細胞研磨成細胞碎片。

    2. 離心去除細胞核:使用離心去除碎片中的細胞核。

    3. 分離RNA:分別使用苯酚和氯仿提取RNA,並用異丙醇將其沉澱。

    4. 溶解RNA:將RNA用緩衝液溶解後,測定其濃度。

    在實驗中需要注意以下幾點:

    1. 嚴格遵循生物安全的實驗規範,避免RNA樣品受到汙染。

    2. 盡可能採用RNAase-free品質的實驗耗材,以避免樣品在處理過程中降解。

    3. 製備過程中需要保持樣品溫度的低溫和鬆弛狀態,以防RNA氧化和降解。

    4. 所有實驗操作需要快速完成,以避免RNA受到氧化和降解的影響。

    5. 在離心、提取和沉澱等步驟中需要注意操作技巧,使RNA樣品完整且純度高。

    6. 所有步驟需要嚴格按照預定程序進行操作,以確保實驗結果準確可靠。

    總之,RNA的Brachet實驗需要細心謹慎的操作和精確的技術,才能得到高質量的RNA樣品。

  • 2 # 簡單雲朵WkY

    1.RNA在細胞內極易降解,樣本選擇時一定要選取新鮮的樣本組織或者取樣後迅速低溫處理(液氮速凍);樣本出現多次反復凍融後,RNA得率會嚴重下降,也會導致RNA降解;RNA提取環境要保持無RNA酶汙染;   2.RNA容易受到環境汙染導致RNA嚴重降解,建議實驗過程中注意更換實驗手套,使用所有耗材應該均無RNA酶的一次性耗材;   

    3.試劑盒中BufferEB(RNA專用)中含有少量EDTA,可能影響下游實驗,使用時適當稀釋,如果用其他洗脫液洗脫,要確保PH>7.5,PH過低影響洗脫效率;   

    4.離心柱漂洗完成後,盡可能烘乾柱膜上殘留乙醇,殘留乙醇會影響洗脫效率和下游實驗效果;柱膜也不建議過度乾燥,沒有乙醇味道殘留最好,如果過度乾燥可能影響RNA溶解;如果A260/230值過低,說明樣本提取過程中漂洗不徹底,有鹽離子殘留,建議增加漂洗次數;   

    5.對於RNA提取,A260/280<1.9說明有可能存在DNA汙染或者蛋白汙染,如果洗脫樣本時沒有使用BufferEB,而使用ddH20(確保無RNA酶),比值或偏低,因為Ph值會影響吸光值,並不表示樣本純度低。

  • 3 # 用戶9760231573521

    需要高質量的樣品,不能出現髒雜質,否則會干擾實驗的結果
    操作人員需要穿戴手套,注意無菌操作,避免RNA的汙染
    實驗室環境需要保證乾淨、整潔,避免灰塵和雜物進入實驗器材
    4、注意實驗器材的消毒和清潔,保證實驗數據的準確性
    5、對於不同物種的RNA,操作方法和條件可能會存在差異,需要根據實際情況進行調整

  • 4 # 盧0260

    1.提取操作時必須戴手套、口罩等防止RNA酶的影響

    2.盡可能在低溫下操作

    3.適量斟酌Trizon等的用量;在每一次離心後除盡蛋白質、不溶物。

    4.Trizon帶有腐蝕性,操作時注意安全(1分)

  • 5 # 不如多索雷斯

    答: Brachet實驗是RNA的化學成分研究經典實驗之一。
    1. 如果您想進行Brachet實驗,您需要注意以下事項:首先,RNA樣本需要純,否則會影響實驗結果。
    其次,實驗過程中需要嚴格控制反應條件、反應時間等因素。
    最後,實驗結果的解釋需要結合RNA的結構、功能等進行考慮。
    2. 除了Brachet實驗,對RNA的研究工作也非常多,涵蓋了RNA的結構、功能、類別等方面。
    所以在進行RNA的相關實驗時,需要全面了解RNA的特點,掌握相關專業知識。

  • 6 # 用戶9716457067441

    RNA Brachet實驗是一種常用的分子生物學技術,以下是實驗注意事項:

    1. 實驗環境應保持無菌狀態,實驗器具和試劑應消毒處理,操作時應佩戴手套和口罩,避免口水和皮膚接觸樣品。

    2. RNA樣品應該保存在-80℃低溫冰箱中,避免反復凍融。

    3. 對RNA樣品進行放大時,應注意均勻性、準確性和精確性,尤其要注意去除DNA殘留。

    4. 在反應過程中,需要保持反應緩慢均勻、溫度適宜、時間到位,操作時請嚴格按照程序進行。

    5. PCR反應後,建議進行凝膠電泳檢查,確保目標RNA明顯有特異性,無汙染和意外反應產物的干擾。