回覆列表
  • 1 # 3478112416

    1.凝膠層析操作簡便,所需設備簡單。有時只要有一根層析柱便可進行工作。分離介質—凝膠完全不需要像離子交換劑那樣複雜的再生過程便可重複使用。

    2.分離效果較好,重複性高。最突出的是樣品回收率高,接近100%。

    3.分離條件緩和。凝膠骨架親水,分離過程又不涉及化學鍵的變化,所以對分離物的活性沒有不良影響。

    4.應用廣泛。適用於各種生化物質,如肽類、激素、蛋白質、多糖、核酸的分離純化、脫鹽、濃縮以及分析測定等。分離的分子量範圍也很寬,如SephadexG類為102~105d;Sepharose類為105~108d。

    5.分辨率不高,分離操作較慢。由於凝膠層析是以物質分子量的不同作為分離依據的,分子量的差異僅表現在流速的差異上,所以分離時流速必須嚴格把握。因而分離操作一般較慢。而且對於分子量相差不多的物質難以達到很好的分離。此外,凝膠層析要求樣品粘度不宜太高。凝膠顆粒有時還有非特異吸附現象。

  • 2 # 清黛光

    凝膠色譜技術也叫凝膠層析技術,因為層析的檢測儀器是色譜儀,所以叫凝膠色譜。它是通過各種凝膠分離、純化蛋白質、核苷酸或者病毒等物質的方法。

    主要有親和層析,離子交換層析,分子篩,疏水層析等。

    親和層析利用凝膠上特異性結合的配體分離純化目的分子;離子交換層析利用目的分子與雜質分子的電荷性質不同進行分離純化;分子篩利用分子大小不一樣進行分離目的分子;疏水層析則利用目的分子與雜質分子的疏水性不同進行分離。

    一種高純度的樣品需要兩種以上的層析方式才能得到。

  • 3 # 飄渺一分鐘

    根據使用的溶劑範圍可以分為親水性、親油性和兩性凝膠。

    親水性凝膠主要用於生物化學研究中對蛋白質、酶等進行分離和分析,親油性凝膠應用於合成的高分子材料和有機體系中化合物的分離和分析。

    選擇和使用不同性能不同孔徑的凝膠決定了分離淨化的效果,通常可根據樣品基質類型和待分離組分的分子大小決定所選擇的凝膠的種類。

  • 4 # Share373

    1、凝膠色譜法又稱為凝膠過濾法、 凝膠層析、凝膠滲透層析、通透層析、分子篩層析。

    2、凝膠色譜技術是六十年代初發展起來的一種快速而又簡單的分離分技術,由於設備簡單、操作方便,不需要有機溶劑,對高分子物質有很高的分離效果。目前已經被生物化學、分子生物學、生物工程學、分子免疫學以及醫學等有關領域廣泛採用,不但應用於科學實驗研究,而且已經大規模地用於工業生產。

    3、凝膠的種類及性質

    (1)交聯葡聚糖凝膠(Sephadex)

    交聯葡聚糖的商品名為Sephadex,不同規格型號的葡聚糖用英文字母G表示,G後面的阿拉伯數為凝膠得水值的10倍。例如,G-25為每克凝膠膨脹時吸水2.5克,同樣G-200克每克千膠吸水20克。交聯葡聚糖凝膠的種類有G-10,G-15,G-25,G-50,G-75,G-100,G-150,和G-200。因此,“G”反映,凝膠的交聯程度,膨脹程度及分部範圍。

    (2)Sephadex LH-20,是Sephadex G-25的羧丙基衍生物, 能溶於水及親脂溶劑,用於分離不溶於水的物質。

    (3)瓊脂糖凝膠:

    商品名很多,常見的有,Sepharose(瑞典,pharmacia ),Bio-Gel-A(美國Bio-Rad)等。瓊脂糖凝膠是依靠糖鏈之間的次級鏈如氫鍵來維持網狀結構,網狀結構的疏密依靠瓊脂糖的濃度。一般情況下,它的結構是穩定的,可以在許多條件下使用(如水,pH4-9範圍內的鹽溶液)。瓊脂糖凝膠在40℃以上開始融化,也不能高壓消毒,可用化學滅菌處理。

    (4)聚丙烯酰胺凝膠:

    是一種人工合成凝膠,是以丙烯酰胺為單位, 由甲叉雙丙烯酰胺交聯成的,經乾燥粉碎或加工成形製成粒狀,控制交聯劑的用量可製成各種型號的凝膠。交聯劑越多,孔隙越小。聚丙烯酰胺凝膠的商品為生物膠-P (Bio-Gel P),由美國Bio-Rad廠生產,型號很多,從P-2至P-300共10種,P 後面的數字再乘1000就相當於該凝膠的排阻限度。

    (5)聚苯乙烯凝膠商品為Styrogel , 具有大網孔結構, 可用於分離分子量1600到40,000,000的生物大分子,適用於有機多聚物,分子量測定和脂溶性天然物的分級,凝膠機械強度好,洗脫劑可用甲基亞碸