1. 低溫可以減少DNA的熱運動，有利於穩定DNA分子與細胞膜之間的吸附作用。這個應該比較好理解，因為Ca2+、DNA（負電）、細胞膜（LPS、負電）之間的靜電作用是放熱的，因此低溫有利（勒夏特列原理）。

2. 低溫可以穩定細胞膜上LPS系統上的“洞”，有利於DNA分子與這些洞吸附，從而促進細胞吸收DNA分子。

3. 低溫（0℃）與熱激溫度（42℃）之間的溫度差改變細胞膜流動性，促進已吸附的DNA分子吞入。

4. 低溫下DNA分子的構象可以保護DNA免受DNase分解。

雖然熱激時間過長（optimal 30s）或者溫度過高（optimal 42℃）確實會降低轉化效率，推測原因是降低細胞生存率，但並沒找到說第一步冰浴與細胞survival有關的。應該說，細胞膜的修復是主要在轉化的復蘇步（37℃)中發生的，因此不能說感受態細胞處於室溫下容易死。