1.首先，將三目顯微鏡擺放在水平桌面或者平台上，以便於更好操作與觀察。

2.細心調節物鏡，保證自己能夠在目鏡中看到被觀察物的大概位置。然後在慢慢調節直到要觀察的物體出現在視野中央。

3.調節三目顯微鏡的焦距，使被觀察物體成像更加的清晰，注意此時要慢慢調節，不要大幅度的轉動焦距，當可以較為清晰地看到被觀察物體後，停止調節。

4.此時我們能夠觀察到的被觀察物已經較為清晰了，但是為了觀察效果更好成像達到最清晰的畫面，我就需要再次調節三目顯微鏡的物鏡和目鏡，與步驟三一樣，這個步驟我們要更加的小心，輕微轉動目鏡和物鏡的螺旋紐，當能夠看到最為清晰的畫面時，這個時候就可以開始觀察物體了。

5.使用完畢以後，我們要將三目顯微鏡各個螺旋紐調回原始狀態，將三目顯微鏡的各小部件用專用包裝盒裝好，然後耐心細緻地將三目顯微鏡收入專用盒中，然後放到不會輕易碰到的指定位置。